Kit de detección de PCR en tiempo real para diarrea epidémica porcina, gastroenteritis transmisible, virus de la enfermedad del Deltacoronavirus porcino y Rotavirus del vino
[Nombre del producto]
Kit de detección de PCR en tiempo real para diarrea epidémica porcina, gastroenteritis transmisible, virus de la enfermedad de Deltacoronavirus porcina y Rotavirus de Swine
[Paquete]
50
pruebas
[Indicación]
el kit de detección de PCR en tiempo real para
diarrea epidémica porcina, gastroenteritis transmisible, virus de la enfermedad de Deltacoronavirus porcina y rotavirus
es aplicable
para
la detección
, tipificación, diagnóstico auxiliar e investigación epidemiológica
de
la PED/TGEV/PDCoV/RV
en
suero porcino, plasma, tejido intestinal, contenido intestinal, ganglios linfáticos mesentéricos, excretas y otras muestras
. Los resultados de la prueba son solo para fines de investigación y no para el diagnóstico clínico.
[
Principales componentes y contenido
]
Nombre
|
Especificación
|
Cantidad
|
Solución de reacción de PED/TGEV/PDCoV/RV
|
1000µl
/tubo
|
1
|
Control positivo de PED/TGEV/PDCoV/RV
|
250µl
/tubo
|
1
|
Control negativo
|
250µl
/tubo
|
1
|
[
Almacenamiento y vida útil
]
Almacenado a -20±5ºC
, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces,
la vida útil es de 12 meses.
[
Modelo
]
Para ABI QuantStudio 5,CFX Opus 96,LightCycler480,Gentier 96E/96R,LineGene 9600 Plus y otros termocicladores.
[
Método de prueba
]
1.Extracción de ácido nucleico
Se
puede llevar a cabo un kit de extracción de ADN/ARN comercializado para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2.amplificación de PCR
2,1 calcular el número de muestras de ensayo, tomar n+2 tubos de reacción de PCR y añadir
20µl
a de solución de reacción a cada tubo.
2,2 Añada
5µl
ácido nucleico de control negativo, control positivo y muestras a los tubos de reacción de PRC anteriores, respectivamente, centrifugar a 8000rpm durante varios segundos y colocarlos en el
termociclador.
2,3 las condiciones de reacción se establecen de la siguiente manera:
Parámetros relevantes del amplificador
|
Sistema
|
Volumen total: 30µl
|
Recogida de señales
|
Señal de fluorescencia cuadrrivalente PED/TGEV/PDCoV/RV
|
Gastroenteritis transmisible (TGEV)
- el canal HEXAGONAL recoge la señal de fluorescencia
|
Diarrea epidémica porcina (PED)
- el canal FAM recoge la señal de fluorescencia
|
El virus de la enfermedad del Deltacoronavirus porcino (PDCoV)
- Cy5 canales recoge fluorescencia señal
|
El
canal ROX del virus del cerdo (RV) recoge la señal de fluorescencia
|
Condiciones de reacción de PCR
|
Etapa
|
Condición
|
Número de ciclo
|
Transcripción inversa
|
55ºC: 15 minutos
|
1
|
Predegeneración
|
95ºC
:
30 segundos
|
1
|
PCR
|
95ºC
:
10 segundos
|
40
|
60ºC:
30 segundos
(Configurado para recoger la señal fluorescente al final de esta etapa)
|
[
Interpretación de los resultados
]
1.determinación de la eficacia del kit de prueba:
(1)
Control positivo: Valor CT de
canales FAM, HEX, Cy5 y ROX
≤
32, curva de amplificación con fase exponencial obvia.
(2)
Control negativo: Los canales FAM, HEX, Cy5 y ROX no tienen curva de amplificación, o la curva de amplificación es recta o ligeramente oblicua
.
2.determinación de los resultados:
Resultado juicio
|
Canal FAM
|
Canal HEXAGONAL
|
Cy5 canales
|
Canal ROX
|
Ácido TGEV positivo
|
-
|
+
|
-
|
-
|
Ácido nucleico PED positivo
|
+
|
-
|
-
|
-
|
Ácido nucleico PDCoV positivo
|
-
|
-
|
+
|
-
|
Ácido nucleico RV positivo
|
-
|
-
|
-
|
+
|
Positivo
de ácido nucleico TGEV y PED
|
+
|
+
|
-
|
-
|
Ácido nucleico positivo TGEV y PDCoV
|
-
|
+
|
+
|
-
|
Ácido
nucleico positivo de PED y PDCoV
|
+
|
-
|
+
|
-
|
Positivo en ácido nucleico TGEV y RV
|
-
|
+
|
-
|
+
|
Positivo de
ácido nucleico de PED y RV
|
+
|
-
|
-
|
+
|
PDCoV y
ácido
nucleico RV positivo
|
-
|
-
|
+
|
+
|
Ácido
nucleico positivo TGEV, PED y RV
|
+
|
+
|
-
|
+
|
Positivo
a ácido nucleico TGEV, PDCoV y RV
|
+
|
-
|
+
|
+
|
Positivo de
ácido nucleico de PED, PDCoV y RV
|
-
|
+
|
+
|
+
|
Ácido nucleico positivo TGEV, PED y PDCoV
|
+
|
+
|
+
|
-
|
Positivo
de ácido nucleico TGEV, PED, PDCoV y RV
|
+
|
+
|
+
|
+
|
TGEV, PED, PDCoV y RV
ácido nucleico
negativo
|
-
|
-
|
-
|
-
|
*Nota:
Si hay una curva de amplificación de crecimiento exponencial y un valor de TC ≤ 36, se determina como "
+
".
Si
no hay curva de amplificación, se determina como "
-
".
Si 36 < valor CT < 40, es
una muestra dudosa
y el análisis debe repetirse para su confirmación.
[
Precauciones
]
-
La gestión del laboratorio
deberá seguir estrictamente
las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación de genes de PCR. El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente. El proceso experimental se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y área de análisis de productos). Todos los consumibles deben ser desechables después de la esterilización. No
se utilizarán aparatos, equipos ni suministros especiales en cada fase de la operación experimental
.
-
Prepare el armario de seguridad biológica para
la fase de preparación de reactivos y muestras. La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
-
Se evitarán en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetida de los reactivos. Antes de su uso, los reactivos se descongelarán por completo y centrifugará a 8000rpm durante varios segundos.
-
Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de la muestra en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela junto con los residuos después de la esterilización.
-
Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta
se tratarán con hipoclorito al 10% o alcohol al 75% o lámpara ultravioleta.
[
Fabricación
]
Nombre:
Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Una filial de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Dirección
: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad Zhucheng, Provincia de Shandong
Código postal: 262233
Shandong Sinder Technology Co., Ltd (Sinder)
fundada en abril de 1999, tiene una amplia gama de productos de sanidad animal. Sinder enfoque en Productos de Salud Animal, vacuna Animal, anticuerpos, Antibióticos, Aditivos de alimento, Producto herbario chino, comida para mascotas, Elisa, y kit de prueba de PCR.
Sinder siempre persiste en el concepto central de "la búsqueda implacable de aumentar el valor del cliente. ' basado en la sanidad animal para lograr un proveedor de servicios para la construcción ecológica de la agricultura y la ganadería. Apoyar el desarrollo eficiente y sostenible de la agricultura y la ganadería. ¡haga que los alimentos sean más seguros y las zonas rurales mejores!
Sinder es una empresa de alta tecnología y uno de los 10 principales fabricantes de medicamentos veterinarios en China y se centra en el negocio de la salud animal. Actualmente, la empresa cuenta con 35 líneas de producción de GMP, 1 laboratorios CNAS, 3 plataformas nacionales de investigación científica y 8 plataformas provinciales de investigación científica propiedad de Sinder.
Sinder tiene 4 centros de I+D ubicados en Qingdao, Zhucheng y Beijing, China, y 1 laboratorios en Silicon Valley en los Estados Unidos. Actualmente, la empresa cuenta con 1.535 empleados, incluyendo más de 200 maestros o más y 18 médicos. Además, la empresa estableció una amplia cooperación técnica con varios institutos nacionales y extranjeros de investigación científica, empresas de sanidad animal y empresas nacionales de medicina veterinaria. Sinder ha realizado 57 proyectos nacionales, provinciales y ministeriales, ha obtenido 7 premios provinciales y ministeriales de progreso científico y tecnológico, ha presidido o ha participado en 23 normas nacionales, ha obtenido 23 nuevos certificados veterinarios (un nuevo medicamento de clase 1st) y 60 patentes autorizadas.