Introduzione
Gli acidi nucleici liberi circolanti, come frammenti di acido nucleico extracellulare specifici per il tumore e mRNA nel sangue o acidi nucleici fetali nel sangue materno, sono presenti nel siero o nel plasma solitamente come frammenti corti, <1000bp(acido nucleico).
Il Micro Kit di acidi nucleici circolanti HiPure consente una purificazione efficiente di questi acidi nucleici circolanti da plasma umano, siero o urina. I campioni possono essere freschi o congelati (a condizione che non siano stati congelati e scongelati più di una volta). DNA, RNA o acidi nucleici virali liberi da cellule circolanti vengono eluiti in acqua senza nucleasi, pronti per l'uso in reazioni di amplificazione o conservazione a -30 - -15°C. Gli acidi nucleici purificati sono privi di proteine, nucleasi e altre impurezze.
Specifiche
Caratteristiche | Specifiche |
Funzioni principali | Isolamento del DNA circolante da 0,6 ml di plasma, siero, fluidi corporei |
Applicazioni | Analisi QPCR, chip liquidi o solidi, ibridazione e rilevamento SNP, ecc. |
Metodo di purificazione | Colonna mini spin |
Tecnologia di purificazione | Tecnologia della silice |
Metodo di processo | Manuale (centrifugazione o vuoto) |
Tipo di campione | Campioni di siero, plasma e altri fluidi privi di cellule |
Quantità campione | 0,6 ml |
Volume di eluizione | ≥30μl |
Tempo per esecuzione | ≤40 minuti |
Volume di trasporto liquido per colonna | 800μl |
Resa legante della colonna | 100μg |
Principio
Questo prodotto è basato sulla purificazione di colonna di silice. Il campione viene lisato e digerito con lisato e proteasi, il DNA viene rilasciato nel lisato. Trasferire su una piastra di adsorbimento e una colonna di filtro. L'acido nucleico viene adsorbito sulla membrana, mentre la proteina non viene adsorbita e viene rimossa mediante filtrazione. Dopo aver lavato proteine e altre impurezze, l'acido nucleico è stato infine eluito con tampone a basso contenuto di sale.
Contenuto | D318002 | D318003 |
Tempi di purificazione | 50 Prep | 250 Prep |
ACL buffer | 40 ml | 200 ml |
Buffer DCW1 | 22 ml | 110 ml |
Buffer DCW2* | 20 ml | 2 x 50 ml |
Proteinasi K | 34 mg | 180 mg |
Tampone di dissoluzione della proteasi | 1.8 ml | 10 ml |
RNA carrier | 110 μg | 310 μg |
Acqua senza nucleasi | 10 ml | 30 ml |
Mini colonne HiPure CFDNA | 50 | 250 |
Provette di raccolta da 2 ml | 100 | 5 x 100 |