Introduzione
Il kit HiPure FFPE Nucleic Acid fornisce un'estrazione del DNA semplice e rapida per campioni di tessuto e sezioni fissati in formalina e paraffinato (FFPE). Questo kit è basato sulla tecnologia di purificazione di colonne di gel di silice, senza estrazione con fenolo-cloroformio o precipitazione con alcol. L'intera estrazione richiede solo 20 minuti (senza il tempo di digestione). Il DNA può essere utilizzato direttamente per applicazioni downstream quali PCR, Southern blot e rilevamento di DNA virale, ecc.
Specifiche
| Caratteristiche | Specifiche |
| Funzioni principali | Isolamento del DNA totale da campioni di tessuto FFPE |
| Applicazioni | PCR, Southern blot e rilevamento di DNA virale, ecc. |
| Metodo di purificazione | Colonna mini spin |
| Tecnologia di purificazione | Tecnologia della silice |
| Metodo di processo | Manuale (centrifugazione o vuoto) |
| Tipo di campione | Tessuto fissato in formalina e paraffinato (FFPE) e sezioni di campioni |
| Quantità campione | <20 mg |
| Volume di eluizione | <20µl |
| Tempo per esecuzione | ≤20 minuti |
| Volume di trasporto liquido per colonna | 4 ml |
| Resa legante della colonna | 100μg |
Principio
Il kit per acidi nucleari FFPE Hipure adotta la purificazione di colonne di gel di silice. Il campione viene deparaffinato mediante xilene e digerito con lisato e proteasi. Dopo 90 crosslincato a ºC pl, DNA/RNA viene rilasciato nel lisato. Aggiungendo etanolo per regolare le condizioni di legame, il campione viene trasferito alla colonna dove DNA/RNA viene adsorbito sulla membrana e la proteina viene rimossa senza adsorbimento. La proteina e altre impurezze vengono lavate mediante tampone GW1, e il sale viene rimosso mediante tampone GW2. Infine, il DNA / RNA viene eluito mediante tampone a basso contenuto di sale.
Vantaggi
| Contenuto | D312602 | D312603 |
| Tempi di purificazione | 50 Prep | 250 Prep |
| Mini colonne HiPure DNA i | 50 | 250 |
| Provette per il prelievo da 2 ml | 50 | 250 |
| DPS. Buffer | 30 ml | 150 ml |
| ATL. Buffer | 15 ml | 60 ml |
| Al. Buffer | 15 ml | 60 ml |
| Buffer GW1* | 22 ml | 88 ml |
| Buffer GW2* | 12 ml | 50 ml |
| Proteinasi K | 24 mg | 120 mg |
| Tampone di dissoluzione della proteasi | 1.8 ml | 10 ml |
| AE buffer | 10 ml | 30 ml |
Conservazione e stabilità
La proteinasi K deve essere conservata a 2-8 °C all'arrivo. Tuttavia, la conservazione a breve termine (fino a 12 settimane) a temperatura ambiente (15-25°C) non influisce sulle loro prestazioni. I componenti del kit rimanenti possono essere conservati a temperatura ambiente (15-25°C) e rimangono stabili per almeno 18 mesi in queste condizioni. L'intero kit può essere conservato a una temperatura compresa tra 2 e 8 °C, ma in questo caso i tamponi devono essere ridisciolti prima dell'uso. Assicurarsi che tutti i tamponi siano a temperatura ambiente quando vengono utilizzati.
Dati sperimentali