Introduzione
Il sistema HiPure Minipreps offre un metodo miniprep DNA plasmidico rapido, semplice ed economico per applicazioni di laboratorio di biologia molecolare di routine.
I kit HiPure Miniprep utilizzano la tecnologia a membrana in silice per eliminare le fasi complicate associate a resine o impasti sciolti. Il DNA plasmidico purificato con Mini Kit è immediatamente pronto per l'uso. Non sono richieste estrazione di fenolo e precipitazione di etanolo, e DNA plasmidico di alta qualità viene eluito in un piccolo volume di tampone Tris o acqua.
Specifiche
Caratteristiche | Specifiche |
Funzioni principali | Isolamento di DNA plasmidico privo di endotossine fino a 30μg da 1-5 ml di batterio coltura mediante piastra legante a 96 pozzetti |
Applicazioni | Trasfezione cellulare, iniezione animale, ecc. |
Metodo di purificazione | piastra a 96 pozzetti |
Tecnologia di purificazione | Tecnologia della silice |
Metodo di processo | Manuale (centrifugazione o vuoto) |
Tipo di campione | Plasmide convenzionale, plasmide inferiore a 30 KB |
Quantità campione | 1-5 ml (x96) |
Resa | 30μg |
Volume di eluizione | ≥75μl |
Tempo per esecuzione | ≤ 60 minuti |
Volume di trasporto liquido per colonna | 800μl |
Resa legante della colonna | 70μg |
Principio
La procedura del plasmide HiPure si basa sulla lisi alcalina di cellule batteriche seguita dall'adsorbimento del DNA su silice in presenza di sale elevato. L'esclusiva membrana in silice utilizzata nel kit sostituisce completamente le impasti in vetro o silice per i minipreparazioni di DNA plasmidico.
La procedura consiste in 3 fasi fondamentali: Preparazione e eliminazione di un lisato batterico mediante metodo alcalino, quindi trasferire il supernatante nella colonna per legare il DNA. Dopo il lavaggio di proteine e altre impurezze, l'acido nucleico è stato infine eluito con tampone a basso contenuto di sale (10 mm Tris, pH9,0, 0,5mm EDTA).
Vantaggi
Contenuto del kit
Contenuto | P115701 | P115702 | P115703 |
Tempi di purificazione | 1 x 96 Prep | 4 x 96 Prep | 20 x 96 Prep |
RNasi A. | 10 mg | 20 mg | 100 mg |
Buffer P1 | 30 ml | 120 ml | 550 ml |
Buffer P2 | 30 ml | 120 ml | 550 ml |
LEN3 buffer | 15 ml | 60 ml | 300 ml |
Buffer LN4 | 80 ml | 270 ml | 2 x 700 ml |
Buffer LN5 | 40 ml | 220 ml | 1100 ml |
Buffer PW1 | 40 ml | 220 ml | 1100 ml |
Buffer PW2 | 25 ml | 100 ml | 2 x 200 ml |
Tampone di eluizione | 30 ml | 60 ml | 250 ml |
Piastra trasparente per lisato | 1 | 4 | 20 |
Piastra DNA HiPure | 1 | 4 | 20 |
Piastra di raccolta da 1,6 ml | 2 | 8 | 40 |
Piastra di raccolta da 0,5 ml | 1 | 4 | 20 |
Conservazione e stabilità
I componenti del kit possono essere conservati a secco a temperatura ambiente (15-25°
C) e sono stabili per almeno 18 mesi in queste condizioni. Se si formano precipitati nei tamponi, riscaldare a 37ºC per
dissolversi. Dopo l'aggiunta di RNasi A, il tampone P1 è stabile per 6 mesi se conservato a 2-8°C.
Guida all'acquisto
Nome | N. CAT | Quantità campione | Tipo di colonna | Volume di eluizioneLo | Resa | Timeper RUN (Timeper RUN | Requisiti della centrifuga |
Kit EFMini plasmide HiPure | P1154 | 10 ml | colonna da 1,5 ml | ≥75μl | 10 70µg/15 ml | ≤40 minuti | centrifuga piccola |
Kit HiPurePlasmid EF 96 | P1157 | 1-5 ml | piastra a 96 pozzetti | ≥75μl | 30µg/1 ml | ≤60 minuti | centrifuga a 96 pozzetti |
Kit Midi HiPurePlasmid EF | P1231 | 30 ml | colonna da 15 ml | ≥0,4 ml | 10 500μg /50 ml | ≤60 minuti | centrifuga da 15 ml |
Kit Maxi HiPurePlasmid EF | P1156 | 100 ml | colonna da 50 ml | ≥0,8 ml | 100 1500µg/200 ml | ≤60 minuti | centrifuga da 50 ml |
Kit Mega HiPurePlasmid EF | P1116 | 500 ml | colonna da 50 ml | ≥0,8 ml | 10 mg/500 ml | ≤70 minuti | centrifuga da 50 ml |