Introduzione
I Mega Kit HiPure Plasmid DNA combinano la potenza della tecnologia HiPure con la consistenza collaudata nel tempo della lisi alcalina-SDS delle cellule batteriche per fornire DNA di alta qualità. Le colonne DNA HiPure facilitano le fasi di legame, lavaggio ed eluizione, consentendo così di processare più campioni contemporaneamente.
Il DNA plasmidico purificato mediante questo sistema è adatto per sequenziamento automatico di DNA fluorescente, digestione con endonucleasi di restrizione, trasfezione di cellule di mammifero e altre manipolazioni. Fino a 10 mg
di DNA plasmidico ad alto numero di copie possono essere purificati da 500 ml di coltura per una notte.
Specifiche
Caratteristiche | Specifiche |
Funzioni principali | Isolamento di DNA plasmidico senza endotossine fino a 10 mg da 500 ml di batterio cultura |
Applicazioni | Trasfezione cellulare, iniezione animale, ecc. |
Metodo di purificazione | Colonna Mega spin |
Tecnologia di purificazione | Tecnologia della silice |
Metodo di processo | Manuale (centrifugazione o vuoto) |
Tipo di campione | Plasmide convenzionale, plasmide inferiore a 30 KB |
Quantità campione | Plasmide ad alta copia: Mezzo di coltura da 500 ml |
Resa | 10 mg |
Volume di eluizione | ≥0,8 ml |
Tempo per esecuzione | ≤ 70 minuti |
Volume di trasporto liquido per colonna | 50 ml |
Resa legante della colonna | 10 mg |
Principio
La procedura del plasmide HiPure si basa sulla lisi alcalina di cellule batteriche seguita dall'adsorbimento del DNA su silice in presenza di sale elevato. L'esclusiva membrana in silice utilizzata nel kit sostituisce completamente le impasti in vetro o silice per i minipreparazioni di DNA plasmidico.
La procedura consiste in 3 fasi fondamentali: Preparazione e eliminazione di un lisato batterico mediante metodo alcalino,
quindi trasferire il supernatante nella colonna per legare il DNA. Dopo il lavaggio di proteine e altre impurezze, l'acido nucleico è stato infine eluito con tampone a basso contenuto di sale (10 mm Tris, pH9,0, 0,5mm EDTA).
Vantaggi
Contenuto | P111602 | P111603 |
Tempi di purificazione | 10 Prep | 50 Prep |
RNasi A. | 60 mg | 2 x 150 mg |
Buffer E1 | 220 ml | 2 x 550 ml |
Tampone E2 | 220 ml | 2 x 550 ml |
Buffer E3 | 220 ml | 2 x 550 ml |
Buffer E4 | 220 ml | 2 x 550 ml |
Tampone E5 | 120 ml | 550 ml |
Buffer PW2 | 25 ml | 2 x 100 ml |
Tampone di eluizione | 30 ml | 120 ml |
Colonne maxi HiPure EF | 10 | 50 |
Siringa Maxi trasparente lisato | 10 | 50 |
Provette di raccolta da 50 ml | 20 | 100 |
Nome | N. CAT | Quantità campione | Tipo di colonna | Volume di eluizioneLo | Resa | Timeper RUN (Timeper RUN | Requisiti della centrifuga |
Kit EFMini plasmide HiPure | P1154 | 10 ml | colonna da 1,5 ml | ≥75μl | 10 70µg/15 ml | ≤40 minuti | centrifuga piccola |
Kit HiPurePlasmid EF 96 | P1157 | 1-5 ml | piastra a 96 pozzetti | ≥75μl | 30µg/1 ml | ≤60 minuti | centrifuga a 96 pozzetti |
Kit Midi HiPurePlasmid EF | P1231 | 30 ml | colonna da 15 ml | ≥0,4 ml | 10 500μg /50 ml | ≤60 minuti | centrifuga da 15 ml |
Kit Maxi HiPurePlasmid EF | P1156 | 100 ml | colonna da 50 ml | ≥0,8 ml | 100 1500µg/200 ml | ≤60 minuti | centrifuga da 50 ml |
Kit Mega HiPurePlasmid EF | P1116 | 500 ml | colonna da 50 ml | ≥0,8 ml | 10 mg/500 ml | ≤70 minuti | centrifuga da 50 ml |