Polvere liofilizzata di Hipure Proteinase K con soluzione separata

Model No.
C12100
Codice SA
2934999001
Capacità di Produzione
100000 Per Month
Prezzo di riferimento
$ 129.60 - 144.00
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Descrizione del Prodotto

 
Descrizione del prodotto

Nome del prodotto   Proteinasi K, ricombinante
Cat. N. e   specifiche   C12100,1g/10g/100g
CAS: 39450-01-6 , C.E. 3.4.21.64
Sinonimi: Peptidasi K, endoproteinasi K, endopeptidasi K.


Introduzione
La proteinasi K è una serina proteasi stabile con ampia specificità del substrato.   Degrada molte proteine allo stato nativo anche in presenza di detergenti.  Non viene attivato da ioni metallici, agenti chelanti (ad esempio EDTA), reagenti solfidrile, o da inibitori della tripsina o della chimotripsina. È stabile su un ampio intervallo di pH (4-12.5 ), con attività ottimale a pH 6.5-9.5. L'attività può essere stimolata mediante l'aggiunta di agenti denaturanti (SDS e urea). La denaturazione rapida dell'enzima avviene a temperatura superiore a 70°C. L'autolisi dell'enzima si verifica sempre più a pH alcalino. Tuttavia, la Proteinasi K non è completamente inattivata dall'autolisi. Alcuni frammenti enzimatici continuano a mantenere la loro completa attività proteolitica, anche dopo un'estesa autolisi.

La proteinasi K viene frequentemente utilizzata in applicazioni di biologia molecolare per digerire proteine indesiderate, come nucleasi in preparazioni di DNA o RNA da microrganismi, cellule coltivate e piante. L'enzima viene tipicamente usato a 50-200 ug/ml in preparazioni di acido nucleico a pH 7.5-8.0 e 37~55oC . I tempi di incubazione variano da 30 minuti a 18 ore.



Ricostituire la proteinasi K.
Sciogliere in 20 mm Tris HCl, pH 7.5, cloruro di calcio 10 mm, e glicerolo 50%, quindi conservare a -20~8°C.  Quando conservare a 2-8°C, il glicerolo è facoltativo. La conservazione a -20°C in assenza di glicerolo può portare alla precipitazione della Proteinasi K. la crescita batterica può verificarsi in soluzioni conservate a 2-8°C per periodi di tempo prolungati. Ca2+ può fungere da stabilizzatore per sopprimere l'autolisi.


Conservazione e stabilità
Magen consiglia di conservare a -20~8°C, se conservato a 2~8°C, il prodotto mantiene l'attività per almeno 2 anni.


Applicazioni
Isolamento di DNA/RNA.


Informazioni di ordinazione
N. Cat PK-1 PK-10 PK-100
Proteinasi K, liofilizzata, > 30 unità/mg di proteina 1 g 10 g 100 g.
N. Cat PBD-100 PBD-1000
Tampone PBD ( Tris 20 mm , pH 7.5, CaCl2 10 mm, glicerolo 50%, conservanti 0.1%) 100 ml 1000 ml



Esperimenti tipici
1.isolamento del gDNA: Sciogliere la Proteinasi K liofilizzata a 20 mg/ml in tampone PBD e utilizzarla con il kit HiPure Universal DNA per isolare il DNA da: 200 ul di sangue di mammifero, 2 x 106  cellule di mammifero coltivate, 10~20 mg di tessuto di mammifero/coda di topo. 20ul della soluzione ricostituita di proteinasi K sono sufficienti.

Preparazione di sezioni di tessuto per l'ibridazione in situ: Per alcuni tessuti, il trattamento di sezioni citologiche con proteinasi K migliorerà la probabilità che le sonde raggiungano gli acidi nucleici cellulari. L'efficacia del trattamento con proteinasi K e la concentrazione ottimale di proteinasi K dipendono fortemente dal tipo di tessuto e da come è stato fissato. Ad esempio, per il trattamento dei vasi sanguigni o del tessuto miocardico, Plenz et al (7) hanno utilizzato le seguenti concentrazioni di proteinasi K: Criosezioni: Fino a 2 g/ml; sezioni incluse in paraffina: Fino a 20 g/ml; sezioni incorporate in metacrilato: Fino a 50 g/ml.



Ispezione di qualità speciale
1. DNasi: Nessuna rilevata
Endonucleasi (nickase): Nessuna rilevata
3. RNasi: Nessuna rilevata
 Rivelazione di DNA: 20mg di Proteinasi K sono stati costituiti da 2ml 0.5% SDS e incubati a 65oC per 30 minuti. Quindi, il DNA totale è stato isolato usando il kit HiPure Circulating DNA (D3182). Il DNA totale è stato eluito mediante 50ul di tampone TE.
 
 
Foto dettagliate

Hipure Proteinase K Lyophilizate Powder with Separate Solution Hipure Proteinase K Lyophilizate Powder with Separate Solution


 
Imballaggio e spedizione

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Certificazioni

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Laboratorio
Hipure Proteinase K Lyophilizate Powder with Separate Solution
Officina

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