Introduzione
Questo prodotto fornisce un modo semplice e veloce per purificare il DNA da piante e tessuti fungini. È possibile processare fino a 100 mg di tessuto. Le procedure di facile utilizzo delle piante forniscono DNA totale puro (genomico, mitocondriale e cloroplasto) per PCR affidabile e blotting meridionale in meno di 1 ora. La purificazione non richiede estrazione con fenolo o cloroformio o precipitazione con alcol e richiede una manipolazione minima.
Specifiche
| Caratteristiche | Specifiche |
| Funzioni principali | Isolamento DNA totale da 100 mg pianta semplice |
| Applicazioni | PCR, SSR, AFLP, RAPD e Southern blot, ecc. |
| Metodo di purificazione | Colonna mini spin |
| Tecnologia di purificazione | Tecnologia della silice |
| Metodo di processo | Manuale (centrifugazione o vuoto) |
| Tipo di campione | Campioni di impianti economici |
| Quantità campione |
Campioni di piante fresche/congelate: ≤ 100 m. GDried pianta / semi campioni: ≤ 20mg |
| Volume di eluizione | ≥30μl |
| Tempo per esecuzione | 30-50 minuti |
| Volume di trasporto liquido per colonna | 800μl |
| Resa legante della colonna | 100μg |
Principio
Il materiale di plantmaterial viene prima disgregato meccanicamente e poi lisato mediante aggiunta di tampone di lisi e incubazione. La RNasi A nel tampone di lisi digerisce l'RNA nel campione. Dopo lisi, proteine e polisaccaridi vengono precipitati con sale. Il tampone legante e l'etanolo vengono aggiunti al lisato eliminato per favorire il legame del DNA alla membrana HiPure.
Il campione viene quindi applicato ad una colonna e quindi centrifugato. Il DNA si lega alla membrana, mentre i contaminanti come proteine e polisaccaridi vengono rimossi efficacemente mediante 2 fasi di lavaggio. Il DNA puro viene eluito in un piccolo volume di tampone a basso contenuto di sale o acqua.
Contenuto del kit
| Contenuto | D316402 | D316403 |
| Tempi di purificazione | 50 Prep | 250 Prep |
| RNasi A. | 10 mg | 50 mg |
| Tampone di dissoluzione della proteasi | 1.8 ml | 5 ml |
| SPL. Buffer | 30 ml | 150 ml |
| Tampone PS | 10 ml | 50 ml |
| Buffer GW1 | 22 ml | 110 ml |
| Buffer GW2* | 12 ml | 2 x 50 ml |
| AE buffer | 15 ml | 60 ml |
| Mini colonne gDNA HiPure | 50 | 2 x 125 |
| Provette di raccolta da 2 ml | 50 | 2 x 125 |