Introduzione
Questo prodotto fornisce un modo semplice e veloce per purificare il DNA da piante e tessuti fungini. È possibile processare fino a 100 mg di tessuto. Le procedure di facile utilizzo delle piante forniscono DNA totale puro (genomico, mitocondriale e cloroplasto) per PCR affidabile e blotting meridionale in meno di 1 ora. La purificazione non richiede estrazione con fenolo o cloroformio o precipitazione con alcol e richiede una manipolazione minima.
Specifiche
Caratteristiche | Specifiche |
Funzioni principali | Isolamento DNA totale da 100 mg pianta semplice |
Applicazioni | PCR, SSR, AFLP, RAPD e Southern blot, ecc. |
Metodo di purificazione | Colonna mini spin |
Tecnologia di purificazione | Tecnologia della silice |
Metodo di processo | Manuale (centrifugazione o vuoto) |
Tipo di campione | Campioni di impianti economici |
Quantità campione |
Campioni di piante fresche/congelate: ≤ 100 m. GDried pianta / semi campioni: ≤ 20mg |
Volume di eluizione | ≥30μl |
Tempo per esecuzione | 30-50 minuti |
Volume di trasporto liquido per colonna | 800μl |
Resa legante della colonna | 100μg |
Principio
Il materiale di plantmaterial viene prima disgregato meccanicamente e poi lisato mediante aggiunta di tampone di lisi e incubazione. La RNasi A nel tampone di lisi digerisce l'RNA nel campione. Dopo lisi, proteine e polisaccaridi vengono precipitati con sale. Il tampone legante e l'etanolo vengono aggiunti al lisato eliminato per favorire il legame del DNA alla membrana HiPure.
Il campione viene quindi applicato ad una colonna e quindi centrifugato. Il DNA si lega alla membrana, mentre i contaminanti come proteine e polisaccaridi vengono rimossi efficacemente mediante 2 fasi di lavaggio. Il DNA puro viene eluito in un piccolo volume di tampone a basso contenuto di sale o acqua.
Contenuto del kit
Contenuto | D316402 | D316403 |
Tempi di purificazione | 50 Prep | 250 Prep |
RNasi A. | 10 mg | 50 mg |
Tampone di dissoluzione della proteasi | 1.8 ml | 5 ml |
SPL. Buffer | 30 ml | 150 ml |
Tampone PS | 10 ml | 50 ml |
Buffer GW1 | 22 ml | 110 ml |
Buffer GW2* | 12 ml | 2 x 50 ml |
AE buffer | 15 ml | 60 ml |
Mini colonne gDNA HiPure | 50 | 2 x 125 |
Provette di raccolta da 2 ml | 50 | 2 x 125 |