Questo kit estrae il DNA plasmidico dai batteri coltivati mediante lisi alcalina, utilizzando una formulazione in soluzione unica e un reagente di rimozione delle endotossine.
Questo kit estrae il DNA plasmidico dai batteri di coltura mediante lisi alcalina, utilizzando una formula di soluzione esclusiva e un reagente di rimozione delle endotossine.
L'OD260/280 del DNA purificato è solitamente intorno a 1.8, e il plasmide può essere applicato direttamente alla trasfezione cellulare o anche ad esperimenti su animali in vivo.
L'OD260/280 di DNA purificato è solitamente intorno a 1.8, e i plasmidi ottenuti possono essere direttamente usati nella trasfezione cellulare e anche in esperimenti su animali in vivo, che richiedono elevata purezza di DNA. Le fasi successive di purificazione vengono eseguite in 1.5 ml.
Il metodo è semplice e non richiede alcuna attrezzatura speciale, non è necessario passare alloro, non estrazione con cloroformio fenolo; fondamentalmente, il DNA rilasciato dalla lisi batterica può essere completamente recuperato.
I plasmidi rilasciati mediante lisi batterica possono essere completamente recuperati senza preoccuparsi della perdita di DNA plasmidico. Questo metodo può estrarre e purificare il DNA plasmidico con un danno minimo al plasmide.
Anche per plasmidi grandi di 10kb o anche 100kb o plasmidi BAC/PAC ultra-grandi, solo il metodo di lisi alcalina può estrarre i plasmidi. Anche per plasmidi grandi di 10kb o anche 100kb o plasmidi BAC/PAC ultra-grandi, fintanto che il metodo di lisi alcalina può estrarli, essi possono essere efficacemente purificati. Il plasmide può essere lisato in qualsiasi piccolo volume con concentrazione fino a 5 ug/ul. 95% di superelica, nessuna endotossina, buon effetto di trasfezione.
Caratteristiche del prodotto:
1.
La quantità di plasmidi estratti è correlata al livello di torta di coltura batterica, al numero di copie di plasmide e ad altri fattori. Se i plasmidi estratti sono in basso
Plasmidi o plasmidi grandi maggiori di 10 kb, la quantità di batteriofago deve essere aumentata e la quantità di PI, P2 e PII deve essere aumentata proporzionalmente.
La quantità di PI, P2 e PII deve essere aumentata proporzionalmente.
2.
Quando si estraggono plasmidi di grandi dimensioni, è necessario essere delicati e utilizzare punte con aperture grandi per evitare danni meccanici al DNA.
Il DNA deve essere danneggiato da taglio meccanico.
3.
Dopo centrifugazione del precipitato di DNA, non può essere visibile alcun precipitato evidente. Se non si nota alcun precipitato e si è preoccupati per la perdita di DNA, è possibile conservare il supernatante fino al completamento della procedura.
Il supernatante può essere trattenuto e identificato mediante elettroforesi dopo il completamento di tutte le operazioni per determinare se il prodotto finale (centinaia di grammi) è ottenuto.
Il DNA precipita mediante centrifugazione sulla parete laterale della provetta e non sono visibili residui di agglomerati visibili).
4.
Il DNA plasmidico ottenuto può essere testato per la concentrazione e la purezza mediante elettroforesi su gel di agarosio e spettrofotometro UV.
Un valore di 1 corrisponde a circa 50 ug/ml di DNA.
Ciò è dovuto principalmente ai diversi gradi di conformazione superelicoidale del plasmide, ed è correlato al tempo in cui gli estratti sono stati incubati, e alla manipolazione degli estratti.
Ciò è dovuto principalmente a diversi gradi di posizione di nuoto plasmidico di conformazione superelicoidale, ed è correlato alla durata della coltura dell'estratto e all'intensità di funzionamento durante l'estrazione. Nel normale funzionamento dei nostri prodotti, le bande di DNA superspirali di base non sono visibili.
La rotazione può superare il 95%.
5.
La dimensione molecolare esatta del DNA plasmidico deve essere linearizzata mediante digestione enzimatica e confrontata con il marcatore del peso molecolare del DNA.
L'esatta dimensione molecolare del DNA plasmidico può essere nota solo dopo linearizzazione enzimatica e confronto con il marcatore di peso molecolare del DNA. La dimensione esatta del plasmide non può essere nota mediante elettroforesi a causa dell'incertezza della posizione di nuoto del plasmide nello stato di ansa o superelica.
RNaseA (10 mg/ml) | 1,3 ml | -20ºC |
Soluzione P1 | 130 ml | 4ºC |
Soluzione P2 | 100 ml | RT |
Soluzione P3 | 110 ml | RT |
Scavenger di impurità A | 3 ml | RT |
Scavenger impurità B | 30 ml | RT |
Scavenger di tossina botulinica | 10 ml | -20ºC |
Pagina prodotto:
50 pezzi/scatola
Shenzhen Smurf Technology Co., Ltd. È un'azienda high-tech certificata da Shenzhen High-Tech Enterprise e innovative Enterprise. Nel 2023 ha ricevuto il certificato nazionale di impresa high-tech.
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