Recombinant de TEV protéase (SA-tag) pour la purification de protéines

N° de Modèle.
G3409-5000U
Habit Appellation
Fine Chemicals
Demande
Industrie, Recherche Scientifique
Propriété
Enzyme et Coenzyme
stockage
-20ºc
période de validité
12 mois
ma
1 jeu
utilisation détaillée
purification des protéines
Paquet de Transport
Carton
Spécifications
5000U
Marque Déposée
Servicebio
Origine
China
Prix de référence
$ 124.20 - 135.00
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Description de Produit

Recombinant de TEV protéase (SA-tag)
Informations produit
Nom du produit No de cat. No. La spécification
Recombinant de TEV protéase (SA-tag) G3409-5000U 5000U

Présentation du produit
Recombinant de TEV est une protéine de la protéase exprimant la cystéine protéase du virus du tabac Etch (VET) avec son étiquette dans Escherichia coli. TEV protéase est couramment utilisé pour la protéase à cystéine, qui peut reconnaître expressément la séquence heptopeptide Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly/SER.E-N-L-Y-F-Q-G/S), et effectuer la digestion enzymatique entre Gln(Q) et de la Gly/Ser(G/S) acides aminés. La température optimale de la digestion de Recombinant TEV est de la protéase 30 ºC , et l'activité enzymatique de la protéase recombinant de TEV est élevé dans la gamme de 29-34 ºC . Cependant, lorsque la température atteint ou dépasse 37 ºC , l'activité enzymatique de la protéase recombinante diminue fortement. vet Dans le fonctionnement réel, afin de préserver la structure et activité biologique de la protéine cible autant que possible, il est recommandé d'utiliser TEV digestion enzymatique de la protéase du jour au lendemain à 4 ºC . La recombinaison de TEV protéase est active dans la gamme de pH de 6.0 à 9.0, mais perd de son activité enzymatique lorsque le pH est inférieur ou égal à 5.TEV protéase a toujours une forte activité dans 400mM imidazole. Par conséquent, pour la purification de la protéine cible contenant son label par le nickel, TEV protéase de colonne peuvent être ajoutés directement à la protéine cible purifié solution contenant une concentration élevée de l'imidazole. À 4 ºC , l'imidazole est éliminé par dialyse et de la digestion enzymatique est effectuée dans le même temps. Il est également possible de retirer son label par digestion enzymatique avec TEV après dialyse de protéase. La VET protéase avec son étiquette dans la protéine cible solution après digestion enzymatique et de l'excisée Son tag peut être retirée par la liaison avec le nickel colonne.
Application : il est souvent utilisé pour déposer le MBP, de la TPS, son ou d'autres protéines marquées à partir de protéines de fusion. TEV a sa propre étiquette de la protéase et peut se lier à la colonne de nickel.
Source : le tabac Etch (VET) Virus de la cystéine protéase, expression recombinante de Escherichia coli, contenant son étiquette.
L'activité enzymatique Définition : à 30 ºC , pH8.0, 3 μg de substrat (contenant du site de clivage de la protéase recombinant de TEV) peut être clivé à 1h de plus de 85 % de la nécessaire unité de l'activité enzymatique.
L'inactivation ou d'inhibition : inhibiteurs de protéases à sérine communs tels que le PMSF, AEBSF, Bestatin, pepstatine et l'EDTA n'inhibent pas TEV l'activité protéase. Les inhibiteurs de protéase ciblant les résidus de cystéine, tels que les NEM ou l'AIA, peut considérablement inhiber l'activité de TEV protéase. TEV protéase maintiennent encore plus l'activité enzymatique en concentration plus élevée de l'imidazole.
La pureté et de concentration : SDS-PAGE DE TEST ≥ 95% de pureté, 10 U/μL.
Solution de stockage de la protéase recombinant de TEV:50 mM Tris-HCl,250 mM de NaCl,1 mM EDTA,5 mM de DTT,50 % (v/v) Glycérol,pH 8.0 .
Mémoire tampon de 10×TEV:500 mM Tris-HCl,500 mM de NaCl, l'EDTA 5 mM,10 mM DTT,pH 8.0 .

Stockage et transport
Transprot avec la glace humide; store à -20 ºC , valide pour 12 mois.

Spécification
Le numéro de composant L'organe G3409-5000U
G3409-1 Recombinant de TEV protéase (SA-tag) (10 U/μL) 500 μL
G3409-2 Mémoire tampon de 10×TEV 3×1 mL
G3409-3  La protéine de contrôle 100 μL
Manuel 1

Étapes de fonctionnement :
1.Système de digestion Portenase recommandation
L'organe Le volume
Mémoire tampon de 10×TEV 5 μL
La protéine d'intérêt 30 μg
Recombinant de TEV protéase (SA-tag) (10 U/μL) 1 μL
DdH 2 O À 50 μL
2.   Le système de réaction a été placé à 30 ºC  pour 1-4h. Si la protéine cible n'est pas stable à 30 ºC , le système de réaction peut être placé à 4 ºC  pendant la nuit pour la digestion enzymatique (environ 16h).
3. La SDS-PAGE TEST a été effectuée sur un échantillon de 10 μL de produit de digestion pour évaluer la digestion posologie et les conditions de réaction

Notes :
1.  Produits enzymatiques doivent être placés dans une boîte de glace ou bain de glace, et stockées à -20 ºC  immédiatement après utilisation. Il est recommandé de stockage séparé.
2. Pour votre sécurité et la santé, veuillez porter une blouse de laboratoire et des gants jetables pour l'exploitation.
Recombinant Tev Protease (His-tag) for Protein Purification Figure 1 : Effets de l'A+B contenant la protéine de fusion de la digestion enzymatique site de la protéase recombinante (condition de digestion VET 30 ºC , pH 8,0, de la digestion enzymatique pour 0min 10min, 20min, 30 min, 1h, 2h, respectivement, correspondant Lane Lane: 1-6, le rapport de masse de substrat à l'enzyme ajouté dans le système de digestion était de 20:1).

Recombinant Tev Protease (His-tag) for Protein Purification Recombinant Tev Protease (His-tag) for Protein Purification Recombinant Tev Protease (His-tag) for Protein Purification Recombinant Tev Protease (His-tag) for Protein Purification
 

 

Réactif Chimique

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