Swescript RT I primer capítulo de síntesis de Adnc Kit (con el removedor de gDNA) 100rxns

No. de Modelo.
G3331-100
Aplicación
Industria, Investigación Científica
Paquete de Transporte
Carton
Especificación
100RXNS
Marca Comercial
Servicebio
Origen
China
Precio de referencia
$ 108.90 - 126.00
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Descripción de Producto


Introducción del producto:
Este producto utiliza la modificación de la transcriptasa inversa mutante para sintetizar el primer capítulo de adnc con un total de ARN o mRNA como plantilla para la eficiencia de la transcripción inversa. El kit contiene todos los reactivos necesarios para sintetizar el primer capítulo de adnc con alta calidad, y ofrece dos tipos de la síntesis de adnc cebadores para la elección: el azar Hexamer imprimación y oligo (dT)18 sintetiza la imprimación de adnc trenzado único de productos que pueden utilizarse directamente para las posteriores reacciones de PCR o qPCR. SWEScript RT I (de la Transcriptasa Inversa) es un mutante de la Transcriptasa Inversa sobre la base de M-MLV la transcriptasa inversa y obtenido a través de la selección evolutiva in vitro. SWEScript RT I no tiene actividad RNASA H. La degradación del ARN en la plantilla de la hibridación de ADN/ARN durante el primer capítulo de síntesis de adnc se evita la reacción, a fin de asegurar la cantidad y duración de la primera cuerda la síntesis de adnc.  En comparación con la enzima de tipo salvaje, la estabilidad térmica y la síntesis de la eficiencia de SweScript RT I son significativamente mejorado, y se puede sintetizar adnc eficientemente en el rango de 42-55ºC, así como de cDNA mientras 10 KB.  
El kit también proporciona el removedor de GDNA reactivo, que rápidamente pueden quitar los restos de ADN genómico de la contaminación a partir del ARN plantillas antes de la transcripción inversa pasos, mejorando la fiabilidad de los resultados experimentales, y simplificar el diseño de cebadores qPCR sin necesidad de cross-exón manual de diseño.

El contenido del paquete :
Cat. No. descripción de producto El volumen
G3331 SweScript RT I primer capítulo de síntesis de adnc Kit (con el removedor de gDNA) 50rxns/100rxns


Componentes :
Número de componentes El componente G3331-50 G3331-100
G3331-1 SweScript RT I enzima Mixa 50 ul 100 ul
G3331-2 Reacción Bufferb 5x 200 ul 400 ul
G3331-3 Oligo (dT)18 primario (100 uM ) 50 ul 100 ul
G3331-4 Azar Hexamer primario (100 uM ) 50 ul 100 ul
G3331-5 Removedor de gDNA 50 ul 100 ul
G3331-6 El removedor de 10x gDNA Buffer 50 ul 100 ul
G3331-7 Agua Nuclease-Free 1mL 1mL
Manual 1 pc 1 pc
A : con el inhibidor de arnasa.
B : con la mezcla de dNTP & Mg² +

Condiciones de almacenamiento :
El transporte de la bolsa de hielo; se almacena a -20ºC la  temperatura, válido durante 12 meses.

Uso :
1. La extracción del genoma
(1) Las plantillas de ARN y nucleasa libres se pusieron de agua con hielo para derretir para uso posterior.
(2) la reacción de eliminación del genoma (se recomienda 10ul sistema de reacción):
El componente El volumen
El removedor de 10x gDNA Buffer 1 ul
Removedor de gDNA 1 ul
De RNA total/arnm 0,1 ng-5 ug /10 pg-0.5 ug
Agua Nuclease-Free Añadir a la 10 ul
(3) Mezclar suavemente y centrifugar.
(4) incubar a 37ºC durante 2 minutos y luego poner sobre el hielo para su uso posterior.
2. Síntesis de los primeros cDNA strand
(1) la preparación de la transcripción inversa del sistema de reacción (20UL se recomienda el sistema de reacción).
El componente El volumen
En el paso anterior, el genoma eliminó el líquido de reacción 10 ul
Tampón de reacción de 5x 4 ul
Oligo (dT)18 primario (100 uM ) 1 ul
O al azar Hexamer primario (100 uM ) O 1 ul
Específicos o Gen primario (2 uM ) O 1 ul
SweScript RT I Mezcla de enzimas 1 ul
Agua Nuclease-Free Añadir a la 20 ul
Nota: Para la alta GC o complejos de las plantillas, las plantillas de ARN, la transcripción inversa-cebadores y nucrenase libres de agua puede ser mezclado con antelación y luego enfriado con hielo rápidamente después de que se mantiene en 65ºCfor 5 min. y luego agregue el resto de componentes.
( (2) Mezclar suavemente y centrifugar.
(3) la transcripción inversa los ajustes de programación:
La temperatura El tiempo
25ºCa 5 min
50ºCb 15-30 min
85ºC 5 seg.
R: Por ejemplo, el Azar Hexamer imprimación es seleccionado y se incuba a 25ºCfor 5 minutos, luego la posterior reacción es llevada a cabo. Si usted decide usar oligo (dT)18 aparejo o imprimación genéticos específicos, puede reaccionar directamente a 50ºC.
B: Para la alta GC o complejos de plantillas, la transcripción inversa puede elevarse la temperatura a 55 ºC .

Notas :
1. Por favor, use guantes desechables durante la operación para evitar la contaminación arnasa.   
2. La transcripción inversa los productos pueden ser almacenadas a -20ºC durante un corto tiempo. Si el almacenamiento a largo plazo es necesario, se recomienda almacenarlas a -80ºC después del embalaje para evitar repetir los ciclos de congelación y descongelación.   
3. Si la plantilla es de origen eucariota, es recomendable seleccionar oligo (dT)18 de imprimación y emparejarlo con la 3' el Poli una cola de arnm de eucariotas para obtener mayor rendimiento de adnc de longitud completa.   
4. Para la transcripción reversa de ARN procariotas, Random Hexamer aparejo o imprimación genéticos específicos.   
5. Imprimación Hexamer aleatorio tiene una amplia aplicabilidad y es adecuado para el arnm, Arnr y Arnt, pequeños ARN y lncRNA plantillas.   
6. Si la transcripción inversa es seguido por qPCR ensayo, oligo (dT)18 y al azar Hexamer cebador manual puede ser mezclado para hacer la síntesis de adnc eficiencia en todas las regiones de arnm de la misma, que contribuye a mejorar la autenticidad y la repetibilidad de los resultados cuantitativos.   
7. Si la posterior qPCR Cebadores diseñados a través de los exones, el genoma extracción paso puede omitirse.   
Swescript Rt I First Strand Cdna Synthesis Kit (With gDNA Remover) 100rxns Swescript Rt I First Strand Cdna Synthesis Kit (With gDNA Remover) 100rxns Swescript Rt I First Strand Cdna Synthesis Kit (With gDNA Remover) 100rxns Swescript Rt I First Strand Cdna Synthesis Kit (With gDNA Remover) 100rxns Swescript Rt I First Strand Cdna Synthesis Kit (With gDNA Remover) 100rxns
 

 

Reactivo Químico

PNEUTEC.IT, 2023