Nome del prodotto
HiPure Microbiome DNA Kit
Cat. N. e
specifiche
D314802,50 Prep/Kit
Introduzione
Il kit DNA Microbiome HiPure rappresenta una soluzione affidabile per l'arricchimento del DNA e l'estrazione di microrganismi parassiti. Il kit è basato sulla tecnologia di purificazione della colonna di gel di silice, che elimina la necessità di estrazione tossica con fenolo-cloroformio e di precipitazioni dell'alcool che richiedono tempo. L'intero processo di estrazione richiede solo 60 minuti. Il kit è adatto per l'arricchimento e l'estrazione di DNA microbico da sangue anticoagulante, tessuti e microrganismi intestinali, e per l'efficace rimozione del DNA cellulare. Il DNA ottenuto può essere utilizzato direttamente per PCR, digestione enzimatica, Southern blot e altri esperimenti.
Principio
La colonna di silice HiPure è basata su una membrana filtrante in fibra di vetro con elevata forza legante. In condizioni di elevata concentrazione di agente ionizzante (come guanidina cloridrato o guanidina isotiocianato), la membrana può adsorbire l'acido nucleico attraverso fattori fisici quali legame idrogeno ed elettricità statica, Mentre la proteina o altre impurezze non sono adsorbite e rimosse. UNA membrana con acidi nucleici adsorbiti viene lavata per rimuovere proteine e sali. Infine, gli acidi nucleici adsorbiti possono essere eluiti dalla membrana con un tampone a basso sale (come acqua sterilizzata) o con acqua. L'acido nucleico ottenuto ha elevata purezza e può essere direttamente utilizzato in vari esperimenti a valle. I campioni fecali sono stati omogeneizzati in un lisato, e ulteriormente lisati in un bagno d'acqua ad alta temperatura, rilasciando DNA nel lisato. Le impurezze fecali sono state rimosse mediante centrifugazione, e il DNA è stato ulteriormente purificato attraverso la colonna. Infine, il DNA è stato eluito mediante tampone AE. Il DNA eluito può essere direttamente usato in PCR, ibridazione Southern, digestione enzimatica e altri esperimenti.
Composizione principale
N. Cat | D3148-02 |
Purificazione | 50 prep |
Mini colonne HiPure DNA i | 50 |
Provette per il prelievo da 2 ml | 50 |
CLB buffer | 500 ml |
ATL. Buffer | 20 ml |
Buffer DL | 20 ml |
Buffer GW2 | 20 ml |
AE buffer | 30 ml |
Proteinasi K | 12 mg |
Tampone di dissoluzione della proteasi | 2 ml |
Miscela DNasi | 550 µl |
Tampone DNasi | 5 ml |
Protocollo | 1 |
Condizioni di conservazione e validità
Il kit HiPure Microbiome DNA, ad eccezione della miscela Proteinasi K e DNasi, può essere essiccato e conservato a temperatura ambiente (15-25 ° C) per 12 mesi. Conservare a 2 8ºC per la conservazione a lungo termine. A bassa temperatura, il tampone ATL può precipitare, Che richiede un bagno d'acqua di 37ºC per dissolvere completamente il precipitato. Dopo aver ricevuto il prodotto, conservare la miscela di Proteinasi K e DNasi a -20ºC°C.