Mini kit plasmide Hipure

Model No.
P100102
Contenuto
Standard
Uso
Reagenti di laboratorio
Fonte
for Lab Research
Habit Denominazione
Chemical Reagent
Applicazione
for Lab Research
Proprietà
Neutral
Pacchetto di Trasporto
Box
Specifiche
100 Preps/Kit
Marchio
Magen Biotech
Origine
China
Prezzo di riferimento
$ 52.65 - 58.50

Descrizione del Prodotto

Descrizione del prodotto

Nome del prodotto   HiPure Plasmid DNA Mini Kit
Cat. N. e   specifiche    P100102,100 Prep/Kit  
Introduzione
Il sistema HiPure Mini fornisce un metodo miniprep DNA plasmidico rapido, semplice ed economico per applicazioni di laboratorio di biologia molecolare di routine. I mini kit plasmidici HiPure utilizzano la tecnologia a membrana in silice per eliminare le fasi complesse associate a resine o impasti sciolti. Il DNA plasmidico purificato con Mini Kit è immediatamente pronto per l'uso. Non sono richieste estrazione di fenolo e precipitazione di etanolo, e DNA plasmidico di alta qualità viene eluito in un piccolo volume di tampone Tris o acqua.




Composizione principale

 Codice prodotto P100102 P100103
 Tempi di purificazione 100 Prep 250 Prep
RNasi A. 5 mg 10 mg
Buffer P1 30 ml 80 ml
Buffer P2 30 ml 80 ml
Buffer P3 40 ml 100 ml
Buffer PW1 60 ml 140 ml
Buffer PW2 20 ml 50 ml
Tampone di eluizione 15 ml 30 ml
Mini colonne HiPure DNA II 100 250
Provette di raccolta da 2 ml 100 250


Condizioni di conservazione e validità
I componenti del kit DNA plasmidico HiPure sono garantiti per almeno un anno se conservati a temperatura ambiente. Se si formano precipitati nei tamponi, riscaldare a 37ºC per dissolversi. Dopo l'aggiunta di RNasi A e del reagente LyseBlue opzionale, il tampone P1 rimane stabile per 6 mesi se conservato a 2-8°C.


Preparazione prima dell'uso
Diluire il tampone PW2 con etanolo al 100% e conservare a temperatura ambiente temperatura
Aggiungere il flaconcino di RNasi A al flacone di Buffer P1 e memorizzazione a 2-8˚C.
Tampone di eluizione a caldo a 70°C se il DNA plasmidico è >10 kb
 
 
Guida alla risoluzione dei problemi
A:basse rese di DNA
1. il tampone PW2 non contiene etanolo :   Prima dell'uso, aggiungere etanolo al tampone PW2.
2.scarsa lisi cellulare : Le cellule potrebbero non essere state adeguatamente disperse prima dell'aggiunta del tampone P2. Agitare per risospendere completamente le cellule.
3. perdita di capacità legante della matrice di colonna durante la conservazione: Seguire il protocollo opzionale per l'equilibratura della colonna prima di trasferire il lisato eliminato nella colonna. Aggiungere 100µL 3M NaOH alla colonna prima di caricare il campione. Centrifugare a 13000 giri/min per 30 secondi. Eliminare il filtrato.


B:il DNA plasmidico galleggia fuori dal pozzetto durante il caricamento del gel di agarosio
1.l'etanolo non è stato completamente rimosso dalla colonna dopo le fasi di lavaggio, centrifugare la colonna come indicato per essiccare la colonna prima dell'eluizione.  


C:contaminazione del DNA ad alto peso molecolare del prodotto
Non agitare o miscelare in modo aggressivo dopo aver aggiunto il tampone P2. Le colture in eccesso contengono cellule lisate e DNA degradato. Non far crescere la cellula per più di 16 ore.


D:l'assorbanza del DNA purificato non riflette accuratamente la quantità di Il plasmide (rapporto A260/A280 è alto o basso)
Il DNA plasmidico è contaminato con RNA :    Il trattamento con RNasi A è insufficiente confermare che la soluzione di RNasi A è stata aggiunta al tampone P1 prima del primo utilizzo. La soluzione di RNasi A può degradarsi a causa di temperature elevate (>65 °C) o di una conservazione prolungata (> 6 mesi a temperatura ambiente).
2. la lettura di fondo è elevata a causa del particolato fine della silice :   Centrifugare il campione di DNA alla velocità massima per 1 minuto; utilizzare il surnatante per ripetere le letture dell'assorbanza.
Imballaggio e spedizione

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Certificato

Hipure Plasmid Mini Kit

Laboratorio

Hipure Plasmid Mini Kit

Officina

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Area prodotti finiti

Hipure Plasmid Mini Kit

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