Nome prodotto
Kit di isolamento e purificazione degli acidi nucleici (Kit MagPure Universal RNA)
Specifiche del prodotto
IVD3020,200Prep/Kit
Uso previsto
Questo prodotto è adatto per l'estrazione rapida
di RNA
da tessuti, cellule, sangue, s e altri campioni clinici.
L'RNA
può essere utilizzato direttamente per
RT
-PCR,
RT
-PCR quantitativa, test del DNA del virus e così via.
Principio
Questo prodotto è basato sul metodo di purificazione di particelle magnetiche ad alto legame. Il campione viene lisato e digerito sotto l'azione di lisato e proteasi. Il DNA viene rilasciato nel lisato. Dopo l'aggiunta di particelle magnetiche e di soluzione legante, il DNA
verrà adsorbito sulla superficie delle particelle magnetiche, e le impurità come le proteine verranno rimosse senza adsorbimento. Le particelle adsorbite sono state lavate con soluzione di lavaggio per rimuovere proteine e impurezze, lavate con etanolo per rimuovere i sali, ed infine il DNA è stato eluito mediante
tampone di eluizione
.
Composizione principale
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N. Cat
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IVD3020
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Composizione
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Tempi di purificazione
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200 prep
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Particelle magnetiche
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Particelle di RNA MagPure
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7 ml
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DNasi i
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4
x
600
µl
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Tampone DNasi
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80
ml
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Tampone di lisi RTL
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150
ml
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MCB buffer
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75
ml
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Sale di guanidina
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Buffer
MW1
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88
ml
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perclorato di sodio
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Buffer
MW2
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50
ml
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Sale di guanidina
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Acqua priva di RNasi
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60 ml
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Tris
/EDTA
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Condizioni di conservazione e
validità
Questo prodotto può essere conservato a temperatura ambiente (15~25ºC
) per 12 mesi.
Le particelle di RNA MagPure, DNasi i vengono
spedite
a temperatura ambiente. Dopo
la ricezione
,
conservare
la DNasi i a
-20ºC
~8ºC e conservare le particelle di RNA Magpure e la proteinasi K a 2
.
Materiali e attrezzature forniti dall'utente
Diluire il tampone MW1/MW2 con etanolo assoluto e conservare a temperatura ambiente
Diluire il tampone MCB con isopropanolo e conservarlo a temperatura ambiente
3.(opzionale) aggiungere 20µl 2-mercaptoetanolo (o 2 M DTT) per 1 ml di tampone di lisi RTL. Questa miscela può essere conservata per 2 settimane a temperatura ambiente.
Protocollo: Purificazione del DNA da tamponi buccali
1.porre il tampone buccale in una provetta per microcentrifuga da 2 ml
e
aggiungere
400µl di
PBS al campione.
Aggiungere 20µl
Proteinasi
K e
400µl
tampone al al al campione. Miscelare immediatamente agitare per 15 s.
3.incubare a 56°C per 10 min. Centrifugare brevemente per rimuovere le gocce dall'interno del coperchio.
Aggiungere
400µl
di etanolo (96-100%) al campione e miscelare nuovamente con vortex.
5.seguire il passaggio 7-12 del protocollo del sangue ed eluire il DNA con 50~75µl
di AE tampone
.
Purificazione automatica mediante KingFisher Flex o
isolamento estrattore simile:
Aggiungere i reagenti/campione al
pozzetto
della piastra a pozzetti profondi secondo la
tabella riportata di seguito.
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Nome della piastra
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Reagenti precaricati
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Aggiunta prima dell'uso
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Piastra campione
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500µl
MCB buffer
30µl
particelle di MagPure RNA
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500µl
lisato cellulare o supernatante di lisato dalla fase A.
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Piastra di lavaggio 1
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600µl
tampone
MW1, inserire 96 punta magnetica
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DNasi
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290µl
tampone DNasi e 10µl
DNasi i
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Piastra di lavaggio 2
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600µl
buffer MW2
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Piastra di lavaggio 3
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600µl
buffer MW2
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Piastra di eluizione
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50~100µl
di acqua priva di RNasi
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2.posizionare un pettine a 96 punte per magneti a pozzetti profondi sulla piastra di lavaggio 1.
Avviare il protocollo R6622_Flex con KingFisher Flex e caricare le piastre.
Aggiungere 450µl
di MCB tampone alla piastra DNasi durante la fase di erogazione.
5.
posizionare nuovamente la piastra DNase nello strumento e premere Avvia. Dopo la pausa, il protocollo continuerà fino alla fine
6.
al termine della sessione, rimuovere le piastre e conservare l'RNA totale purificato.