[Uso previsto]
La famiglia JAK di tirosina chinasi non recettoriale, include JAK1, JAK2, JAK3 e TYK2. Fattori di crescita e citochine possono regolare la trascrizione genica attraverso l'attivazione dipendente DA JAK del trasduttore di segnale e dell'attivatore della trascrizione (STAT). La via di trasduzione del segnale JAK-STAT regola la proliferazione cellulare, la differenziazione, l'apoptosi e la regolazione immunitaria. L'attivazione di JAK2 mediante mutazione dell'aminoacido in posizione 617 (V617F) è associata a disturbi mieloproliferativi, tra cui policitemia vera (mutazioni riscontrate nel 90% dei casi), trombocitemia essenziale (50%) e mielofibrosi idiopatica (50%). La mutazione JAK2 è il principale strumento diagnostico di MPD. Il kit di rilevamento della mutazione Ultrassay JAK2 V617F è un saggio altamente selettivo e sensibile per la rivelazione della mutazione V617F nell'oncogene JAK2. La tecnologia brevettata di Ultrassay consente di rilevare il 5% di DNA mutante in background con il 99% di DNA normale, garantendo al contempo che i falsi negativi siano minimizzati. La procedura è facilmente adattabile per l'uso nella lavorazione di campioni ad alta resa.
[Principio]
L'hotspot di mutazione del codone JAK2 V617 è stato rivelato mediante il metodo ARMS-qPCR. Sulla base del principio di base della PCR fluorescente, i primer e le sonde specifiche sono stati progettati per rilevare i bersagli, e la differenza del numero (concentrazione) delle sostanze testate nei campioni originali è stata determinata analizzando i risultati dell'amplificazione.
[Vantaggio]
Sensibilità elevata: Rilevamento accurato della mutazione Jak2 V617F fino al 5%.
Specificità superiore: La specificità può essere raggiunta al 99.5% utilizzando la tecnologia ARMS-PCR;
Funzionamento semplice: Il sistema di reazione a due provette è in 90 minuti;
4. Affidabile: Controlli interni ed esterni inclusi
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[Campione accettabile]
EDTA a sangue intero; campioni FFPET
[Macchina riconpressa]
Ultrassay Archimed X4/X6, sistema qPCR in tempo reale eQ9600, sistemi PCR in tempo reale ABI 7500, sistemi PCR in tempo reale ABI 7500, QuantStudio™5
Sistemi PCR in tempo reale, sistema PCR in tempo reale LightCycler® 480, sistema PCR in tempo reale BioRad CFX96, BioRad CFX
Sistema PCR in tempo reale Opus 96,